液相色谱常用的定量方法：外标法、内标法原创2022-04-08 10:18·Time拾荒者定量分析是在定性分析的基础上，需要纯物质作为标准样品。液相色谱的定量是相对的定量方法，即：由已知的标准样品推算出被测样品的量。液相色谱法定量的依据被测组分的量（W）与响应值（A）成正比，W=fXA定量校正因子（f）：是定量计算公式的比例常数，其物理意义是单位响应值（峰面积）所代表的被测组分的量。由已知标准样品的量和其响应值可以求得定量校正因子。测定未知组分的响应值，通过定量校正因子即可求得该组分的量定量分析常用术语：样品：含有待测物，供色谱分析的溶液。分为标样和未知样。标样：浓度已知的纯品未知样：浓度待测的混合物样品量：待测样品的原始称样量稀释度：未知样的稀释倍数组分：欲做定量分析的色谱峰，即含量未知的被测物组分的量：被测物质的含量积分：由计算机对色谱峰进行的峰面积测量的计算过程校正曲线：组分含量对响应值的线性曲线，由已知量的标准物建立，用于测定待测物的未知含量。常用的定量方法1、外标法标准样品曲线法，分为外标法和内标法。外标法在液相色谱中用的最多。内标法准确但是麻烦，在标准方法中用的最多。用被测化合物的纯品作为标准样品，配制成一系列的已知浓度的标样。注入色谱柱得到其响应值（峰面积）。在一定的范围内，标样的浓度与响应值之间存在较好的线性关系，即W=fXA，制成标准曲线。在完全相同的条件下，注入未知样品，得到欲测组分的响应值。根据已知的系数f，即可求出欲测组分的浓度。外标法的优点：操作、计算简单，是一种常用的定量方法；无需各组分都被检出、洗脱；需要标样；标样及未知样品的测定条件要一致；进样体积要准确。外标法的缺点：实验条件要求高，如检测器的灵敏度，流速、流动相的组成都不能发生变化；每次进样体积要有很好的重复性。2、内标法操作：将已知量的内标样加入标准样中，制成混合标样，并配制一系列的已知浓度的工作标样。混合标样中标样与内标样的摩尔比不变。注入色谱柱，以（标样峰面积/内标样峰面积）为响应值。根据响应值与工作标样浓度之间存在的线性关系，即W=f X A，制成标准曲线。将已知量的内标样加入到未知样品，注入色谱柱，得到欲测组分的响应值。根据已知的系数f，即可求出欲测组分的浓度。内标法的特点：操作过程中样品和内标是混合在一起注入色谱柱的，因此只要混合溶液中被测组分与内标的量的比值恒定，上样的体积变化不会影响定量结果。内标法抵消了上样的体积，乃至流动相、检测器的影响，因此比外标法精确。
2024年12月28日，首发2024-05-13 10:53·历史其实挺有趣
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