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时间悄然流逝，我在异国的生活逐渐稳定。然而，2013年，一次与妈妈的电话中，我察觉到了她的异样。扛不住我再三盘问，妈妈透露了父亲患癌的事情。为了不让我分心，他们一直隐瞒着。默克生命科学 | 6-磷酸葡萄糖脱氢酶（EC 1.1.1.49）的酶学测定2024-01-08 10:55·不能胖胖胖1.目标建立葡萄糖-6-磷酸脱氢酶酶促测定的标准化操作流程。如果感兴趣可以到默克www.sigmaaldrich.cn看具体内容2.适用范围本操作流程适用于大多数酶促测定葡萄糖-6-磷酸脱氢酶活性参数的产物。该测定不可用于测定来自肠膜明串珠菌的葡萄糖-6-磷酸脱氢酶。3.定义3.1.纯水 – 来自去离子系统的水，在25 ?C的电阻率大于或等于18MΩ?cm3.2.单位定义 - 在pH 7.4、25 °C并存在β-NADP的情况下，一单位每分钟可将1.0 μmole D-葡萄糖-6-磷酸氧化成6-磷酸-D-葡萄糖酸盐。3.3.G-6-PDH - 6-磷酸葡萄糖脱氢酶3.4. β-NAD = β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸，氧化形式3.5. β-NADPH - β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸，还原形式4.讨论5.责任分析服务人员应遵循本书面实验方案。6.安全有关危险因素及合适的操作注意事项，参阅安全数据说明书（SDS）。7.操作流程7.1.条件T = 25 °C，pH = 7.4，A340 nm，光路 = 1 cm7.2.方法分光光度法速率测定7.3.试剂：7.3.1. 250 mM双甘氨肽（缓冲液）利用纯水和双甘氨肽游离碱（货号G1002）配制33 mg/mL的溶液。在25 °C下用1 M NaOH或1 M HCl将pH调节至7.4。7.3.2. 60 mM D-葡萄糖6-磷酸溶液（G-6-P）利用纯水和D-葡萄糖6-磷酸单钠盐（Sigma-Aldrich货号G7879）在配制17 mg/mL的溶液。7.3.3. 20mM β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸盐溶液（β-NADP）利用纯水和β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸钠盐（货号N0505）在配制15.4 mg/mL的溶液。7.3.4. 300 mM氯化镁溶液（MgCl2）利用纯水和1.0 M氯化镁溶液（货号M1028）配制0.3 mL/mL的溶液。7.3.5. 6-磷酸葡萄糖脱氢酶溶液（酶）临使用前，利用低温缓冲液（试剂7.3.1）配制0.3-0.6单位/mL的溶液。7.4.操作流程7.4.1. 将下列试剂(mL)加入适宜的容器，以制备反应混合物
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